綠藻枝仔冰

進實驗室動手做研究的人，許多時候會感到很挫折，因為某些實驗往往想起來很簡單，文獻上寫的方法步驟也不複雜，但是實際上做下去卻不是那麼一回事。出問題的地方常是一些枝微末節的小事，雖然好像沒什麼大不了的，但遇上這樣的問題，有時候就擾亂了實驗步調，影響情緒，增加許多困擾。如果有幸解決了，當研究結果要發表時，卻因為投稿文章的篇幅有限，技術問題通常不會寫進原始文獻裡，況且這種「小事情」不是所要探討的課題重點，為突顯主題不宜旁生枝節。到最後要怎麼 解決這種技術難題，往往就變成某實驗室的祕技，不為外人所知。

最近實驗室來了一位訪問學者，其實她算是我們的資深學姊，二十多年前就在我們實驗室從事博士後研究，後來找到教職，當教授去了。我老闆不知道是怎麼遊說的，讓她願意回來短暫訪問幾週，動手做一些實驗，而老闆指派我跟著這位老學姊一起做。大家討論研究主題，決定拿單細胞鞭毛藻為材料，用生化方法來找出細胞 質內與纖毛鞭毛生長有關的活性蛋白分子，所以第一步是要能夠製備出高濃度的細胞質萃取液。

經過一番討論，我們的構想是這樣的：我們先養出一大缸一大缸綠藻，接著把細胞分批拿去離心，比較重的細胞會沉在離心管底部，與原本養細胞的液體分離。把上面的液體倒掉後，用少量的緩衝液重新把沉在底部的細胞打散，就能濃縮細胞的濃度。反覆幾次，把好幾缸的細胞集中起來，懸浮液體積愈來愈小，於是得到的是很濃很濃的細胞。然後把這些高濃度細胞用液態氮快速冷凍再重新解凍，經過這樣又凍又融化，細胞膜會破掉，把細胞質釋放出來，成為一小鍋細胞質濃湯。最後把這小鍋濃湯用超高速離心機再離心一次，把細胞璧、破碎的細胞碎片… 等等重物甩到管底，小心吸出上面的液體，這就是我們要的高濃度細胞質萃取液。

只要養好細胞、離心、除去液體、冷凍解凍、再去高速離心，這樣就行了。很簡單吧。當初我們也都這麼想。結果等到把濃度很高的細胞冷凍解凍後，想將細胞質濃湯放進超高速離心機所用的小離心管裡，問題卻來了。原來這時候細胞已經濃縮太多倍，說是細胞濃湯，其實是黏稠如膏狀，用微量吸管吸都吸不起來，通通沾附在 吸管頭上，無法移進高速離心管裡。老學姊想了想，放棄用吸管去吸取，改用小藥杓去刮，結果照樣黏得到處都是，狼狽不堪，材料損失大半。我說不如先不解凍，趁著還凍成固態的細胞冰塊時趕緊打碎，然後用小鑷子把細胞碎冰夾起來丟到高速離心管裡再讓它解凍。聽來可行，但試了一下，我們的動作太慢，小碎冰一下子就融化了，還是東沾西黏搞得髒兮兮。把養了好幾天的幾公升綠藻濃縮成幾cc，就剩下最後一個步驟，結果現在卻卡在這裡。怎麼辦呢？

老學姊突然靈光一閃，說：Let's try to make some Popsicle!

Popsicle? 這是什麼？原來 Popsicle 是美國小孩子常吃的冰棒。老學姊拉直了迴紋針，用鉗子剪成兩段小鐵條，在快速冷凍細胞時把小鐵條插到濃濃細胞湯膏中，等到冰凍成固體了，捏住小鐵條一拉，凍結的綠藻細胞膏就變成一根迷你的綠藻枝仔冰，可以放進小高速離心管裡，讓它解凍融化後直接去超高速離心。輕輕鬆鬆，乾乾淨淨，而且我們可以把好幾枝迷你小冰棒先後放到同一個小離心管中，就能將所有的樣品集中收集在同一個管子中，避免不同管之間的變異。

哈哈，老學姊得意得不得了。就靠她的這招綠藻枝仔冰，我們解決了如何移動濃稠細胞湯膏的技術瓶頸。